Direkte immunofluorescensdeteksjon

Bevis for vevsstrukturer, antistoffer og patogener gjennom immunmerking er populært, moderne og nøyaktig. Immunfluorescens refererer til immunmerking med forberedte fluorescerende antistoffer som er laget for å gløde under UV-lys.

På Direkte immunofluorescensdeteksjon underlaget undersøkes direkte med lysende antistoffer, uten primære antistoffer eller kunstige antigener.

Hva er direkte immunfluorescensdeteksjon?

Direkte påvisning av immunofluorescens er en diagnostisk metode basert på kunnskap om immunologi, immunfarging og immunhistokjemi. Fokuset her er på antistoffers evne til å binde seg til bestemte punkter i vev eller til antigener i et serum. Disse stedene er epitoper.

I biokjemisk diagnostikk er det kunstige antistoffer eller mimetika (entall: mimetisk) som gjør at disse antistoff-antigenbindinger kan markeres ved fluorescens eller radioaktivitet. Kunstige antistoffkonjugater binder seg på den ene siden til epitopene og på den andre siden har en lysstoffrør når det gjelder immunfluorescens. Dette er et alternativ til bruk av radioaktive markører. Det spesielle med direkte påvisning av immunofluorescens sammenlignet med indirekte deteksjon er at antistoffet som binder seg til antigenets epitop i det undersøkte materialet også representerer antistoffkonjugatet med den lysstoffrørmarkøren. Ytterligere antistoffer er ikke nødvendig for direkte påvisning.

Fluorescein, som skinner under UV-lys, og fluoresceinisothiocyanate (FITC) brukes som fargestoffer for å lage det kunstige antistoff-konjugatet i immunfluorescens. Så langt leser det litt komplisert, men direkte immunfluorescensdeteksjon er standard medisinsk laboratoriediagnostikkmetode for en lang rekke medisinske spørsmål. Antistoffene med lysstofffargen er klare for salg.

Funksjon, effekt og mål

Direkte påvisning av immunfluorescens er tilgjengelig for vevsundersøkelser for farging av visse strukturer i vev. Men de er også tilgjengelige for enkeltceller. Her spiller flowcytometri en stor rolle. Til slutt er det faststoff- og flytende fase-immunanalyser. Immunofluorescensundersøkelser av vev er spesielt viktig innen onkologi, dvs. medisinsk behandling av kreftsykdommer.

Tumorspesifikke antigener i tumorvev kan påvises direkte med immunofluorescens. Disse undersøkelsene på vevsprøver fra svulster er ofte viktige for å finne ut hvor de eksisterende metastaser kom fra kroppen, eller for å kunne avgjøre om en svulst er godartet eller ondartet. Undersøkelsen av individuelle celler med direkte immunofluorescensdeteksjon brukes til å finne virusantigener, bakterielle antigener og andre epitoper.

For eksempel kan du finne ut om cellene er smittet av et virus og hvilket stadium av infeksjonssyklusen cellene er i. Navnet FACS (= fluorescensaktivert cellesortering) er en svært effektiv flytcytometri-metode der cellene merket med fluorescens blir distribuert til forskjellige prøverør avhengig av fargetype. Denne prosedyren er viktig innen immunologi, hematologi og smittsomme sykdommer.

Immunfluorescensimmunanalyser tillater direkte påvisning av miljøgifter, genmodifiserte organismer og visse tilsetningsstoffer i mat. I dette eksperimentelle oppsettet er det alltid en fast og en flytende fase. Tallrike patogener, inkludert HIV-viruset som forårsaker AIDS, kan også påvises direkte. Når man oppdager smittsomme og autoimmune sykdommer, er det imidlertid ofte et spørsmål om å oppdage antistoffer i stedet for antigener. Dette er forsvarsmolekylene som dannes av kroppens immunforsvar. I henhold til definisjonen som er presentert her, er slike bevis ikke direkte bevis, siden de fluorescerende antistoffene ikke kobles direkte til kroppens egne antigener, men til antigenene i testarrangementet.

Disse antigenene i den eksperimentelle oppsettingen er igjen knyttet til kroppens egne antistoffer. Direkte påvisning av immunfluorescens for vanlige infeksjoner, for eksempel forårsaket av HIV-virus og klamydia, brukes bare i spesielle deteksjons- og bekreftelsestester. Det er tester for mange flere sykdommer. I de fleste situasjoner er indirekte påvisning av antistoffer mer egnet for smittsomme sykdommer, da kroppens eget immunsystem har en genial evne til å huske tidligere infeksjoner. I andre situasjoner kompletterer direkte påvisning av antigener og indirekte påvisning av antistoffer hverandre. Sistnevnte viser at en infeksjon har skjedd før, mens førstnevnte gir mer presis informasjon om den nåværende statusen til aktiviteten til patogenet.

Du finner medisinene dine her

Risiko, bivirkninger og farer

Ved direkte påvisning av immunofluorescens, som med alle medisinske bevis, er det to risikoer: risikoen for et falskt, positivt resultat og risikoen for et falskt, negativt resultat. Falske, positive resultater forårsaker psykologisk ubehag og stort stress for pasienten.

Derfor blir tilleggsprosedyrer lagt til positive resultater, spesielt hvis diagnosen fører til drastiske livsendringer. Risikoen for et falskt, negativt resultat er at pasienten ikke lærer om trusselen mot sin egen helse og kanskje til og med for folkehelsen i god tid. Derfor er det godt å gjøre mye research og lage og tilby et stort antall forskjellige immunfluorescens direkte deteksjoner klare for salg. Sammen med andre direkte og indirekte påvisningsmetoder for sykdommer og patologier øker dette diagnosens nøyaktighet.

Direkte deteksjon er basert på antistoffkonjugatet, som på den ene siden binder seg til epitopene til antigenene og på den andre siden også forårsaker fluorescens. Et slikt produkt blir derfor bare brukt i en type testprosedyre og brukes ikke til andre typer testprosedyrer.Dette er en viktig prosedyreforskjell til det indirekte beviset, der de fluorescerende antistoffene er gitt av primære antistoffer for epitopbinding. Antistoffkonjugatet er derfor egnet for forskjellige tester. Denne prosessuelle forskjellen er forskjellig fra den medisinske forskjellen mellom indirekte påvisning av antistoffer og direkte påvisning av antigener.